Mga problema at solusyon ng mahabang peptide synthesis

Sa biological na pananaliksik, ang mga polypeptide na may mahabang pagkakasunud-sunod ay karaniwang ginagamit.Para sa mga peptide na may higit sa 60 amino acid sa pagkakasunud-sunod, ang gene expression at SDS-PAGE ay karaniwang ginagamit upang makuha ang mga ito.Gayunpaman, ang pamamaraang ito ay tumatagal ng mahabang panahon at ang huling epekto ng paghihiwalay ng produkto ay hindi maganda.

Mga hamon at solusyon para sa mahabang peptide synthesis

Sa synthesis ng mahabang peptides, palagi tayong nahaharap sa isang problema, iyon ay, ang steric hindrance ng condensation reaction ay tumataas sa pagtaas ng sequence sa synthesis, at ang oras ng reaksyon ay kailangang ayusin upang makumpleto ang reaksyon.Gayunpaman, kung mas mahaba ang oras ng reaksyon, mas maraming epekto ang nagagawa, at isang bahagi ng target na peptide ang nabuo.Ang mga naturang residues - ang mga deficient na peptide chain ay mga pangunahing impurities na ginawa sa mahabang peptide synthesis.Samakatuwid, sa synthesis ng mahabang peptide, ang pangunahing problema na dapat nating pagtagumpayan ay upang galugarin ang mataas na kalidad na mga kondisyon ng reaksyon at mga pamamaraan ng reaksyon, upang gawing mas komprehensibo at buo ang reaksyon ng condensation ng amino acid.Bilang karagdagan, bawasan ang oras ng reaksyon, dahil mas mahaba ang oras ng reaksyon, mas hindi makontrol ang mga side reaction, mas kumplikado ang mga by-product.Samakatuwid, ang sumusunod na tatlong punto ay buod:

Maaaring gamitin ang microwave synthesis: Para sa ilang mga amino acid na nakatagpo sa proseso ng synthesis na hindi madaling isama, maaaring gamitin ang microwave synthesis.Ang pamamaraang ito ay may kapansin-pansin na mga resulta, at lubos na binabawasan ang oras ng reaksyon, at binabawasan ang pagbuo ng dalawang pangunahing by-product.

Maaaring gamitin ang paraan ng fragment synthesis: Kapag ang ilang peptides ay mahirap ma-synthesize ng mga karaniwang pamamaraan ng synthesis at hindi madaling linisin, maaari nating gamitin ang buong condensation ng ilang amino acid sa isang partikular na segment ng peptide sa peptide chain sa kabuuan.Ang pamamaraang ito ay maaari ring malutas ang maraming mga problema sa synthesis.

Maaaring gamitin ang Acylhydrazide synthesis: acylhydrazide synthesis ng peptides ay isang paraan ng solid-phase synthesis ng N-terminal Cys peptide at C-terminal polypeptide hydrazide kemikal pumipili reaksyon sa pagitan ng pagbuo ng amide bonds upang makamit ang peptide bonding method.Batay sa posisyon ng Cys sa chain ng peptide, hinahati ng pamamaraang ito ang buong chain ng peptide sa maraming mga pagkakasunud-sunod at synthesize ang mga ito ayon sa pagkakabanggit.Sa wakas, ang target na peptide ay nakuha sa pamamagitan ng liquid-phase condensation reaction.Ang pamamaraang ito ay hindi lamang lubos na binabawasan ang oras ng synthesis ng mahabang peptide, ngunit makabuluhang pinatataas din ang kadalisayan ng huling produkto.

Mahabang paglilinis ng peptide

Ang partikularidad ng mahabang peptides ay hindi maaaring hindi humahantong sa mga kumplikadong bahagi ng krudo peptides.Samakatuwid, isang hamon din na linisin ang mahabang peptides ng HPLC.amyloid serye ng proseso ng pagdalisay ng polypeptide, sumisipsip ng maraming karanasan at matagumpay na ginamit sa paglilinis ng mahabang peptide.Sa pamamagitan ng paggamit ng mga bagong kagamitan, paghahalo ng maramihang mga sistema ng paglilinis, paulit-ulit na paghihiwalay at iba pang mga pamamaraan ng karanasan, ang rate ng tagumpay ng mahabang paglilinis ng peptide ay lubos na napabuti.