Ang mga recombinant na antigen ng protina ay kadalasang mayroong iba't ibang epitope, ang ilan sa mga ito ay sequence epitope at ang ilan ay structural epitope.Ang mga polyclonal antibodies na nakuha sa pamamagitan ng pagbabakuna ng mga hayop na may denatured antigens ay mga pinaghalong antibodies na partikular sa mga indibidwal na epitope at maaaring gamitin sa pangkalahatan upang makita ang mga natural na istruktura o denatured na target na protina.Ang isang side benefit ng paggamit ng mga denatured protein bilang immunogens ay ang mga denatured protein ay malamang na maging mas immunogenic at maaaring pasiglahin ang isang malakas na immune response sa mga hayop.
Ang sistema ng pagpapahayag ng Escherichia coli ay karaniwang pinipili para sa mga layuning antigenic dahil ito ang pinakamahal na sistema sa mga tuntunin ng oras at pera.Upang mapabuti ang posibilidad ng pagpapahayag ng target na protina at ang kaginhawaan ng paglilinis, kung minsan ay isang maliit na fragment lamang ng target na protina, tulad ng isang partikular na domain, ang ipinahayag.
Ang tatlong-dimensional na istraktura ng mga protina
Ang Tiyak na Domain Ng Isang Protein
Kung ang layunin ng paghahanda ng antibody ay para lamang sa pagtuklas ng wb, ito ay matipid at mabilis na gumamit ng synthetic na maliit na peptide bilang antigen, ngunit may panganib ng mahinang immunogenicity o non-regenicity dahil sa hindi naaangkop na pagpili ng peptide segment.Dahil ang paghahanda ng antibody ay nangangailangan ng mahabang panahon, dalawa o tatlong magkakaibang mga segment ng peptide ang madalas na pinipili upang maghanda ng mga antibodies gamit ang polypeptide antigen upang matiyak ang rate ng tagumpay ng eksperimento.
Ang kadalisayan ng polypeptide antigen para sa pagbabakuna ay kinakailangan na higit sa 80%.Kahit na ang isang mas mataas na kadalisayan ay maaaring theoretically makakuha ng mga antibodies na may mas mahusay na pagtitiyak, sa pagsasanay, ang mga hayop ay palaging gumagawa ng isang malaking bilang ng mga di-tiyak na mga antibodies, kaya masking ang mga benepisyo ng antigen kadalisayan.
Bilang karagdagan, ang paghahanda ng mga antibodies mula sa maliliit na peptides ay dapat na naka-cross-link sa naaangkop na carrier antigen upang mapahusay ang immunogenicity nito.Dalawang karaniwang antigenic carrier ay KLH at BSA.
Oras ng post: Mar-23-2023